玻璃器具等的清洗、烘干、包扎、滅菌

　�。�2）吸管：洗凈、烘干后的吸管，在吸口的一頭塞入少許脫脂棉花，以防在使用時造成污染。塞入的棉花量要適宜，多余的棉花可用酒精燈火焰燒掉。每支吸管用一條寬約4~5cm的紙條，以30~50℃的角度螺旋形卷起來，吸管的高等在頭部，另一端用剩余的紙條打成一結，以防散開，標上容量，若干支吸管包扎成一束進行滅菌。使用時，從吸管中間擰斷紙條，抽出試管。
　�。�3）試管和三角瓶：試管和三角瓶都需要做合適的棉塞，棉塞可起過濾作用，避免空氣中的微生物進入容器。制作棉塞時，要求棉花緊貼玻璃壁，沒有皺紋和縫隙，松緊適宜。過緊易擠破管口和不易塞入；過松易掉落和污染。棉塞的長度不小于管口直徑的2倍，約2/3塞進管口。
　　目前，國內(nèi)已開始采用塑料試管塞，可根據(jù)所用的試管的規(guī)格和試驗要求來選擇和采用合適的塑料試管塞。
　　若干支試管用繩扎在一起，在棉花部分外包裹油紙或牛皮紙，再用繩扎緊。三角瓶加棉塞后單個用油紙包扎。
　　（四）、玻璃器材的滅菌
　　滅菌:干熱滅菌:160～165℃烘箱中滅菌2h；或濕熱滅菌:121℃20～30min
　　u干熱滅菌法
　　1、將包扎好的玻璃器皿擺入電熱烘箱中，相互間要留有一定的空隙，以便空氣流通。
　　2、關緊箱門，打開排氣孔，接上電源。
　　3、待箱內(nèi)空氣排出到一定程度時，關閉上排氣孔，加熱至滅菌溫度后，固定溫度進行滅菌：160℃—165℃保持2小時。2小時后切斷電源。
　　4、待烘箱內(nèi)溫度自然降溫冷卻到60℃以下后，再開門取出玻璃器皿，避免由于溫度突然下降而引起玻璃器皿碎裂。
　　高壓蒸汽滅菌法
　　1、關好排水閥門，放入純凈水或蒸餾水至標度。注意水量一定要加足，否則容易造成事故。
　　2、將須要滅菌的器材、培養(yǎng)基等裝入滅菌鍋中，加蓋密封。旋緊螺旋時，先將每個螺旋旋轉到一定程度（不要太緊），然后再旋緊相對的兩個螺旋，以達到平衡旋緊，否則易造成漏氣，達不到完全滅菌的目的。
　　3、通電加溫，打開排氣活門，排盡鍋內(nèi)的空氣。通常當壓力表指針升至5磅或0.05MPa時，打開排氣活門放氣，待壓力表指針降至零點一小段時間后，再關閉活門。即活門沖出的全部是蒸汽時則表示完全，此時可關閉排氣活門，如果過早關閉活門，排氣不完全，也達不到完全滅菌的目的。
　　4、恒溫滅菌:0.1MPa或15磅壓力保持20～30分鐘。壓力表的指針上升時，鍋內(nèi)溫度也逐漸升高，當壓力表指針升至0.1MPa時或15磅時，鍋內(nèi)溫度相當于120℃～121℃（等于一個大氣壓），此時開始計算滅菌時間，控制熱源，使處于0.1MPa或15磅壓力保持20～30分鐘，即能達到完全滅菌的目的，然后停止加溫。當達到所需溫度時開始計時，并在此溫度下保持所需的時間。
　　5、降溫：自然降溫或打開活門排汽降溫。稍微打開一點排氣活門，使鍋內(nèi)蒸汽緩慢排除，然后逐漸開大活門，氣壓徐徐下降，注意勿使排氣過快，否則會使鍋內(nèi)的培養(yǎng)基沸騰而沖脫或沾染棉花塞，但排氣太慢又使培養(yǎng)基在鍋內(nèi)，受高溫處理時間過長，對培養(yǎng)基也是不利的。一般從排氣到打開鍋蓋以10分鐘左右為好。
　　6、當鍋內(nèi)蒸汽完全排盡時即壓力表指針降到零時，要立即打開鍋蓋。
　　7、取出滅菌物品：當鍋內(nèi)溫度下降到60℃左右時器材或培養(yǎng)基。如培養(yǎng)基需制備固體斜面培養(yǎng)基時，則應趁熱將試管斜放在桌上，上面蓋上報紙以免落灰塵，冷卻后便可收起。
　　8、較后將高壓滅菌器內(nèi)的剩余水排出。
　　9、觀察滅菌效果。把滅菌培養(yǎng)基放入25℃溫箱中，培養(yǎng)48小時觀察滅菌效果。48小時后不見雜菌生出，便證明培養(yǎng)基已達到滅菌目的，可以使用。
　　五、思考題
　　1、干熱滅菌和高壓蒸汽法適用范圍如何?
　　2、電熱烘箱和高壓鍋如何操作?各有哪些使用注意事項?